Ganoderma lucidum-ի հակաքաղցկեղային ազդեցությունը մարդու օստեոսարկոմայի բջիջների վրա

Մեր ուսումնասիրությունը ցույց է տալիս, որ Ganoderma lucidum/reishi/lingzhi-ն ցուցադրում է հակաուռուցքային հատկություններ օստեոսարկոմայի բջիջների վրա in vitro:Պարզվել է, որ Ganoderma lucidum-ն արգելակում է կրծքագեղձի քաղցկեղի բջիջների աճը և միգրացիան՝ ճնշելով Wnt/β-catenin ազդանշանը:Այն ճնշում է թոքերի քաղցկեղը կիզակետային կպչունության խանգարման և MDM2-ով միջնորդավորված Slug-ի քայքայման միջոցով:Ganoderma lucidum-ն արգելակում է կրծքագեղձի քաղցկեղը PI3K/AKT/mTOR ուղու նվազակարգավորման միջոցով, Ganoderma lucidum-ը հակաուռուցքային դեր է խաղում սուր լեյկեմիայի բջիջներում՝ արգելափակելով MAPK ուղին:

CCK-8 և գաղութների ձևավորման փորձարկումները, որոնք գնահատում էին Ganoderma lucidum-ի ազդեցությունը օստեոսարկոմայի բջիջների գծի կենսունակության և տարածման վրա, ցույց տվեցին, որ Ganoderma lucidum-ը ճնշում է MG63 և U2-OS բջիջների տարածումը ժամանակից և կոնցենտրացիայից կախված եղանակով և նվազեցնում է բջիջների գաղութացման ունակությունը.

Ganoderma lucidum-ը բարձրացնում է պրոապոպտոտիկ գեների արտահայտումը, և հոսքի ցիտոմետրիայի վերլուծությունը ցույց է տվել, որ MG63 և U2-OS բջիջների ապոպտոզը մեծանում է Ganoderma lucidum-ով բուժումից հետո:Բջջային միգրացիան տարբեր կենսաբանական վարքագծի հիմքն է, ներառյալ անգիոգենեզը, վերքերի բուժումը, բորբոքումը և քաղցկեղի մետաստազները:Ganoderma lucidum-ը նվազեցնում է երկու բջջային գծերի միգրացիան և ներխուժումը և արգելակում է տարածումը, միգրացիան և ներխուժումը և առաջացնում է օստեոսարկոմա բջիջների ապոպտոզ:

Շեղված Wnt/β-catenin ազդանշանը սերտորեն կապված է բազմաթիվ տեսակների քաղցկեղի ձևավորման, մետաստազիայի և ապոպտոզի հետ, ընդ որում օստեոսարկոմայում նկատվում է Wnt/β-catenin ազդանշանային ազդանշանի վերակարգավորում:

Այս ուսումնասիրության մեջ կրկնակի լյուցիֆերազի ռեպորտաժի փորձարկումները ցույց են տվել, որ Ganoderma lucidum բուժումը արգելափակում է CHIR-99021-ակտիվացված Wnt/β-catenin ազդանշանը:Սա հետագայում ապացուցված է մեր ցուցադրությամբ, որ Wnt թիրախային գեների տառադարձումը, ինչպիսիք են LRP5-ը, β-catenin-ը, ցիկլին D1-ը և MMP-9-ը, արգելակվում է, երբ օստեոսարկոմայի բջիջները բուժվում են Ganoderma lucidum-ով:

Նախորդ հետազոտությունները կլինիկական նմուշներում ցույց են տվել, որ LRP5-ը օստեոսարկոմայում նորմալ հյուսվածքի նկատմամբ կարգավորվում է, և LRP5-ի արտահայտումը փոխկապակցված է մետաստատիկ հիվանդության և վատ հիվանդությունից զերծ գոյատևման հետ՝ LRP5-ը դարձնելով օստեոսարկոմայի պոտենցիալ թերապևտիկ թիրախ:

β-catenin ինքնին առանցքային թիրախ է Wnt/β-catenin ազդանշանային ուղու մեջ, և β-catenin-ի արտահայտումը օստեոսարկոմայում զգալիորեն ավելացել է:Երբ β-catenin-ը ցիտոպլազմից միջուկ է տեղափոխվում, այն ակտիվացնում է իր ներքևում գտնվող թիրախային գեների արտահայտությունը, որոնք ներառում են ցիկլին D1, C-Myc և MMPs:

Myc-ը հիմնական պրոտո-օնկոգեններից մեկն է և կարևոր դեր է խաղում գեների էքսպրեսիայի ակտիվացման, տրանսկրիպացիայի և արգելակման գործում: Հաղորդվել է, որ C-Myc օնկոգենի ճնշումը հրահրում է մի քանի ուռուցքային բջիջների ծերացում և ապոպտոզ: օստեոսարկոմա.

Ցիկլին D1-ը բջջային ցիկլի G1 փուլային կարգավորիչ է և արագացնում է G1/S փուլային անցումը:Ցիկլին D1-ի չափազանց արտահայտվածությունը կարող է կրճատել բջջային ցիկլը և խթանել բջիջների արագ տարածումը տարբեր տեսակի ուռուցքներում:

MMP-2-ը և MMP-9-ը ստրոմելիսիններ են, որոնք ունեն արտաբջջային մատրիցային բաղադրիչները քայքայելու հատկություն, ինչը կարևոր հատկանիշ է ուռուցքի անգիոգենեզի և ներխուժման համար:

Սա ենթադրում է, որ Wnt/β-catenin թիրախային գեները առանցքային դեր են խաղում օստեոսարկոմայի առաջընթացի մեջ, և որ այդ ազդանշանային հանգույցների արգելափակումը կարող է ունենալ դրամատիկ թերապևտիկ ազդեցություն:

Այնուհետև մենք հայտնաբերեցինք Wnt/β-catenin ազդանշանային թիրախային գեների mRNA-ի և սպիտակուցի արտահայտությունը PCR-ի և western blotting-ի միջոցով:Երկու բջջային գծերում էլ Ganoderma lucidum-ն արգելակել է այս սպիտակուցների և գեների արտահայտումը:Այս արդյունքները հետագայում ցույց են տալիս, որ Ganoderma lucidum-ը արգելակում է Wnt/β-catenin ազդանշանը՝ թիրախավորելով LRP5, β-catenin, C-Myc, cyclin D1, MMP-2 և MMP-9:

E-cadherin-ը տրանսմեմբրանային գլիկոպրոտեին է, որը լայնորեն արտահայտված է էպիթելի բջիջներում և միջնորդում է կպչունությունը էպիթելի բջիջների և ստրոմալ բջիջների միջև:E-cadherin էքսպրեսիայի ջնջումը կամ կորուստը հանգեցնում է ուռուցքային բջիջների միջև կպչունության կորստի կամ թուլացմանը, ինչը թույլ է տալիս ուռուցքային բջիջներին ավելի հեշտությամբ շարժվել, այնուհետև ուռուցքը ներթափանցել, ցրվել և մետաստազացնել:Այս ուսումնասիրության ընթացքում մենք պարզեցինք, որ Ganoderma lucidum-ը կարող է վերկարգավորել E-cadherin-ը՝ դրանով իսկ հակազդելով օստեոսարկոմայի բջիջների Wnt/β-catenin միջնորդավորված ֆենոտիպին:

Եզրափակելով, մեր արդյունքները ցույց են տալիս, որ Ganoderma lucidum-ը արգելափակում է օստեոսարկոմայի Wnt/β-catenin ազդանշանը և, ի վերջո, հանգեցնում է օստեոսարկոմայի բջիջների ակտիվության նվազմանը:Այս բացահայտումները ցույց են տալիս, որ Ganoderma lucidum-ը կարող է օգտակար և արդյունավետ թերապևտիկ միջոց լինել օստեոսարկոմայի բուժման համար, հարակից արտադրանքները ներառում են.ganoderma lucidum սպորային յուղ փափուկ գելեր/ռեյշի սպոր oiլ փափուկ գելեր,ganoderma lucidum սպոր փոշի/ռեյշի սպոր փոշի